[关键词]
[摘要]
目的探讨抗白细胞介素(IL)-13单抗通过缓解杯状细胞化生及增生在急性声门下喉炎治疗中的作用及其分子机制。方法采集海南医学院第一附属医院收治的33例临床急性声门下喉炎患儿的外周血标本,根据Westley哮喉评分将患儿分为轻度组(Mild group)和中-重度组(Moderate-Severe group)。体外在气/液界面(ALI)培养正常人支气管上皮细胞(NHBE细胞),细胞实验分组:Group-1(对照组,NHBE细胞维持培养)、Group-2(纤毛细胞诱导组)、Group-3(IL-13处理组)、Group-4(IL-13+抗IL-13单抗处理组)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定外周血血清或细胞培养上清液炎症因子IL-10、干扰素γ(IFN-γ)和IL-13水平。采用免疫印迹(Western blot)法测定杯状细胞分化标志物麦芽凝集素(WGA)和纤毛细胞分化标志物乙酰化-α-微管蛋白(AAT)的表达水平,以及磷酸化(p-)胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和ERK1/2的表达水平,采用光学显微镜测量细胞直径。在体动物实验中,将30只雌性C57BL/6J小鼠随机分为Control组、Model组[使用卵清蛋白(OVA)+脂多糖(LPS)诱导哮喘小鼠模型]和Model+anti-IL-13 antibody组(鼻滴法给予Model组小鼠抗IL-13单抗治疗),每组10只。结果与Mild group相比,Moderate-Severe group外周血血清IL-10、IFN-γ和IL-13水平均升高(P<0.05)。与Group-1细胞相比,Group-2 AAT表达水平上调(P<0.05);Group-3 WGA表达水平上调(P<0.05),IL-10、IFN-γ和IL-13水平升高(P<0.05),杯状细胞直径增大(P<0.05),p-ERK1/2水平上调(P<0.05);与Group-3相比,Group-4 WGA表达水平下调(P<0.05),IL-10、IFN-γ和IL-13水平降低(P<0.05),杯状细胞直径减小(P<0.05),p-ERK1/2水平下调(P<0.05)。4组细胞ERK1/2表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。在体动物实验结果显示,与Control组小鼠相比,Model组小鼠支气管炎症评分升高(P<0.05);与Model组相比,Model+anti-IL-13 antibody组小鼠支气管炎症评分降低(P<0.05)。结论抗IL-13单抗可抑制气道杯状细胞化生和增生,或许可用于缓解急性声门下喉炎。
[Key word]
[Abstract]
[中图分类号]
[基金项目]
海南省卫生健康行业科研项目(22A200029)