目的探讨结直肠癌患者的Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)、神经母细胞瘤病毒癌基因RAS同源物(NRAS)、鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B(BRAF)、人表皮生长因子受体2(HER2)基因突变及微卫星不稳定性（MSI）状态与临床病理特征之间的关系。方法收集2019年10月至2022年3月在该院接受治疗的226例结直肠癌患者的临床资料，采用二代测序技术检测KRAS、NRAS、BRAF、HER2基因突变情况和MSI状态，应用免疫组化法评估错配修复系统（MMR）状态，采用多因素Logistic回归分析KRAS、NRAS、BRAF、HER2与临床病理特征的关系。结果在226例结直肠癌患者中，KRAS基因突变频率为54.9%，NRAS基因突变频率为5.3%，BRAF基因突变频率为8.4%，HER2基因扩增突变频率为1.8%。黏液腺癌KRAS基因的突变频率高于普通腺癌（P＜0.05），右半结肠癌KRAS基因突变的风险增加（OR=2.145，P=0.012）。而NRAS基因突变在左半结肠和直肠癌频率较高（P＜0.05）。BRAF基因突变在低分化类型及微卫星高度不稳定（MSI-H）的结直肠癌中突变频率均较高（P＜0.05），右半结肠BRAF基因突变的风险增加（OR=2.844，P=0.042）。HER2基因扩增突变表现肝肺等远处转移（P＜0.05）。KRAS基因突变与NRAS、BRAF、HER2扩增突变是相互排斥的，差异有统计学意义（P＜0.05）。MSI-H在右半结肠中的发生频率更高(P＜0.05)。226例标本检出10例标本错配修复缺陷（dMMR）/MSI-H，8例标本dMMR/微卫生稳定，5例标本错配修复正常/MSI-H，dMMR和MSI-H之间存在中等程度的一致性（Kappa=0.575）。结论结直肠癌患者中，KRAS、NRAS、BRAF、HER2基因及MSI状态与临床病理特征有关，联合检测能够提供更准确、有效的数据，以指导患者的治疗临床用药和预后判断。