目的分析2020-2022年某三甲医院感染性疾病病原菌分布及耐药性。方法对2020-2022年在某三甲医院入院治疗的1 928例感染性疾病患儿的临床资料进行回顾性分析。所有患儿入院后均对其痰液、血液、粪便、分泌物、尿液、脑脊液标本进行细菌鉴定和药敏试验，随后对其病原菌分布及耐药性进行统计分析。结果2020-2022年某三甲医院共分离出非重复病原菌1 928株，病原菌主要分离于痰液（67.17%），其次为血液（12.03%）、粪便（11.00%）、分泌物（6.48%）、尿液（2.70%）、脑脊液（0.62%）。1 928株病原菌中的革兰阴性菌1 202株（62.34%），主要为流感嗜血杆菌、卡他性莫拉菌，分别占24.17%、15.82%；革兰阳性菌726株（37.66%），主要为肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌，分别占21.59%、12.29%；另外2020-2022年病原菌分别占32.57%（628/1 928）、38.43%（741/1 928）、28.99%（559/1 928）。流感嗜血杆菌对氨苄西林/舒巴坦、复方磺胺甲噁唑、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶抗菌药物的耐药率均超过65.00%；卡他性莫拉菌对复方磺胺甲噁唑、氨苄西林/舒巴坦抗菌药物的耐药率均超过40.00%；肺炎链球菌对克林霉素、青霉素、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、红霉素抗菌药物的耐药率均超过87.00%；金黄色葡萄球菌对克林霉素、红霉素、青霉素抗菌药物的耐药率均超过47.00%，其中对青霉素的耐药率为88.61%。结论2020-2022年某三甲医院感染性疾病的病原菌以革兰阴性菌为主，且对临床常用抗菌药存在不同程度的耐药性。因此，临床实践中应严格落实医院感染防控措施，谨慎使用抗菌药物，可根据患儿感染的分布特点、药敏试验结果合理选用抗菌药物，从而对医院感染性疾病的预防具有重要意义。