目的建立一种快速、灵敏的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法用于同时测定人血浆中的还原型辅酶Q10（泛醇-10）和氧化型辅酶Q10（泛醌-10），并实现临床应用。方法血浆标本经甲醇沉淀蛋白，以辅酶Q9为内标，使用Kinetex C18（3.0×50 mm，2.6 μm，100）色谱柱等度洗脱进行柱分离。采用电喷雾离子源正离子化方式，以多反应监测方式进行质谱定量检测。考察该方法的特异性、标准曲线与定量下限、精密度与正确度、稳定性等。结果泛醇-10和泛醌-10的保留时间分别为1.07和1.81 min，单个样品分析时间为3.2 min。泛醇-10和泛醌-10分别在50~2 000和1~100 ng/mL的线性范围内具有良好的线性关系，且定量下限均可达1 ng/mL。批内和批间精密度均≤9.7%，正确度为96.2%~103.9%，该方法具备较高的正确度和精密度。室温放置6 h、4~8 ℃冷藏5 d、-20 ℃冷冻放置30 d存放条件不影响对分析物浓度进行准确测定。结论该方法分析时间短，灵敏度较高，血浆用量少，适用于血浆标本中泛醇-10和泛醌-10的血药浓度监测及准确测定。