目的探讨急性胰腺炎（AP）患者血清微小RNA（miR）-365a-3p、miR-10a-5p的表达变化及与疾病严重程度的关系。方法选取2023年1月至2024年1月于该院治疗的AP患者102例为研究组，根据病情严重程度将患者分成轻症急性胰腺炎（MAP）组、重症急性胰腺炎（SAP）组。另选择同期该院的体检健康者102例为对照组。采用实时荧光定量PCR检测miR-365a-3p、miR-10a-5p水平，采用酶联免疫吸附试验检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、C-反应蛋白（CRP）水平，采用Pearson相关分析AP患者血清miR-365a-3p、miR-10a-5p水平与急性生理学和慢性健康状况评价（APACHE） Ⅱ评分、Ranson评分及生化指标TNF-α、IL-6、CRP的相关性，采用多因素Logistic回归分析SAP的影响因素，绘制受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-365a-3p、miR-10a-5p对AP和SAP的诊断价值。结果研究组血清miR-365a-3p、miR-10a-5p水平均低于对照组（P<0.05）。MAP组血清miR-365a-3p、miR-10a-5p水平均高于SAP组（P<0.05）。MAP组APACHEⅡ评分、Ranson评分及TNF-α、IL-6、CRP水平均低于SAP组（P<0.05）。Pearson相关结果显示，AP患者血清miR-365a-3p、miR-10a-5p水平与APACHEⅡ评分、Ranson评分均呈负相关（P<0.05），AP患者血清miR-365a-3p、miR-10a-5p与TNF-α、IL-6、CRP均呈负相关（P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示，血清TNF-α、IL-6、CRP均为SAP的危险因素（P<0.05），miR-365a-3p、miR-10a-5p均为SAP的保护因素（P<0.05）。ROC曲线结果显示，血清miR-365a-3p、miR-10a-5p联合诊断AP的曲线下面积（AUC）为0.832（95%CI 0.777~0.887），大于miR-365a-3p单独诊断的AUC（0.742，95%CI 0.674~0.810，Z=2.539，P=0.011）、miR-10a-5p单独诊断AUC（0.676，95%CI 0.602~0.750，Z=4.366，P<0.001）；二者联合诊断SAP的AUC为0.859（95%CI 0.776~0.920），大于miR-365a-3p单独诊断的AUC（0.733，95%CI 0.637~0.816，Z=2.078，P=0.038）、miR-10a-5p单独诊断AUC（0.718，95%CI 0.620~0.803，Z=2.249，P=0.024）。结论血清中miR-365a-3p、miR-10a-5p表达与AP疾病严重程度有关，二者联合诊断SAP的效果优于单一诊断。