目的探讨长链非编码RNA（lncRNA）GAS5靶向微小RNA-21（miR-21）通过磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路抑制肺癌细胞的上皮-间质转化和自噬。方法实时定量聚合酶链反应（qPCR）检测lncRNA GAS5在5例非小细胞肺癌（NSCLC）组及癌旁组中的表达。用双荧光素酶报告基因实验检测lncRNA GAS5对miR-21的靶向作用。另将A549细胞分为5组，包括pcDNA-null组、pcDNA-GAS5组、pcDNA-GAS5+mimic-NC组、pcDNA-GAS5+mimic组、pcDNA-GAS5+mimic+BEZ235组。用qPCR检测lncRNA GAS5和miR-21表达。用蛋白质印迹法检测PI3K、磷酸化Akt（p-Akt）、磷酸化mTOR (p-mTOR)、贝克兰蛋白1（Beclin1）、微管相关蛋白1轻链3（LC3）-Ⅱ、LC3-Ⅰ、上皮钙黏蛋白（E-cadherin）、神经钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、扭转蛋白1（Twist1）、核增殖相关抗原（Ki67）和增殖细胞核抗原（PCNA）表达。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物法检测细胞增殖活力。结果NSCLC组lncRNA GAS5表达明显高于癌旁组，差异有统计学意义（P＜0.05）。双荧光素酶报告基因实验确定A549细胞中lncRNA GAS5对miR-21有直接靶向作用。与pcDNA-null组比较，pcDNA-GAS5组细胞增殖活力减少，lncRNA GAS5、PI3K、p-Akt、p-mTOR、Beclin1、LC3-Ⅱ、N-cadherin、Vimentin、Twist1、Ki67、PCNA表达下调，miR-21、LC3-Ⅰ、E-cadherin表达上调，差异有统计学意义（P＜0.05）。与pcDNA-GAS5+mimic-NC组比较，pcDNA-GAS5+mimic组细胞增殖活力上调，PI3K、p-Akt、p-mTOR、Beclin1、LC3-Ⅱ、N-cadherin、Vimentin、Twist1、Ki67、PCNA表达上调，miR-21、LC3-Ⅰ、E-cadherin表达下调，差异有统计学意义（P＜0.05）。与pcDNA-GAS5+mimic组比较，pcDNA-GAS5+mimic+BEZ235组细胞增殖活力下调，PI3K、p-Akt、p-mTOR、Beclin1、LC3-Ⅱ、N-cadherin、Vimentin、Twist1、Ki67、PCNA表达下调，LC3-Ⅰ和E-cadherin表达上调，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论lncRNA GAS5通过miR-21抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路，从而抑制肺癌细胞的上皮-间质转化和自噬，减少细胞增殖活力。