目的建立上海地区成年非妊娠女性血清β-人绒毛膜促性腺激素（β-HCG）的参考区间，并探讨其与年龄的关系。方法选取2021年3月至2023年12月该院的854例非妊娠女性为研究对象，最终纳入800例符合标准者。采用磁微粒酶免法检测所有血清标本β-HCG水平，对不同年龄段血清β-HCG结果进行统计学分析，并用单侧95%参考区间法计算各年龄段的参考区间。结果非妊娠女性血清β-HCG结果呈非正态分布，Spearman相关分析显示β-HCG中位水平与年龄相关（相关系数为0.859，P<0.05）。采用百分位数法建立的参考区间分别是18~<41岁0.00~3.03 mIU/mL，41~55岁0.00~4.61 mIU/mL，＞55岁0.00~6.80 mIU/mL，不同年龄组间血清β-HCG水平比较差异有统计学意义（P<0.05）。经文献回顾，不同实验室血清β-HCG的参考区间具有差异，该研究根据实际情况建立适合的参考区间并通过验证。结论应按年龄段建立成年非妊娠女性血清β-HCG的参考区间，为临床诊断和治疗提供科学依据。