目的探讨直接接种法、研磨后消化法和消化后研磨法对海分枝杆菌培养结果的影响。方法采集2022年6月至2024年3月于该院皮肤科就诊的122例疑似海分枝杆菌感染患者皮损组织标本，其中浅表皮肤型44例，皮下组织型78例。分别采用直接接种法、研磨后消化法和消化后研磨法处理标本，分析3种方法对海分枝杆菌培养阳性检出率和污染率的影响。结果浅表皮肤型海分枝杆菌培养的阳性检出率为47.7%（21/44），皮下组织型培养的阳性率为67.9%（53/78）。采用研磨结合消化法处理皮肤或皮下组织标本均较直接接种法的阳性检出率高，污染率低，差异有统计学意义（P<0.05）。浅表皮肤型标本研磨后消化法较消化后研磨法的阳性检出率高，污染率低，差异有统计学意义（P<0.05）；皮下组织型研磨后消化法较消化后研磨法阳性检出率高，但差异无统计学意义（P>0.05）。3种前处理方法的海分枝杆菌初培养时间差异无统计学意义（P>0.05）。结论对皮肤组织标本采用研磨后消化的前处理方法，对皮下组织标本采用研磨后消化或消化后研磨法的前处理方法，可明显提高海分枝杆菌培养的阳性检出率，同时降低杂菌污染率。