目的探讨肿瘤患者非血液无菌体液中多重耐药菌（MDRO）感染特征，并分析其耐药情况。方法收集青海省中医院2022年1月至2023年12月86份肿瘤患者送检的无菌体液标本，分离获得病原菌后进行培养、鉴定及药敏试验，分析病原菌感染特征和耐药情况。结果86份非血液无菌体液标本主要来源于腹水和引流液，占比分别为55.81%、29.07%，其次为胆汁、穿刺液和脑脊液，占比分别为5.81%、3.49%、1.16%。革兰阴性菌58株（56.86%），主要为大肠埃希菌（23.53%）；革兰阳性菌41株（40.20%），主要为金黄色葡萄球菌（14.71%）；真菌3株（2.94%）。大肠埃希菌对头孢唑林、环丙沙星、左氧氟沙星和头孢他啶有较高耐药性，耐药率分别为75.00%、58.33%、45.83%、37.50%，对替加环素和亚胺培南敏感；肺炎克雷伯菌对头孢唑林、左氧氟沙星、头孢吡肟有较高耐药性，耐药率分别为50.00%、41.67%、33.33%，对替加环素和阿米卡星敏感。金黄色葡萄球菌对青霉素G、红霉素、克林霉素有较高耐药性，耐药率分别为86.67%、73.33%、60.00%，对万古霉素、庆大霉素、利福平、呋喃妥因和四环素敏感；粪肠球菌对头孢唑林、庆大霉素、克林霉素、红霉素有较高耐药性，耐药率分别为100.00%、87.50%、37.50%、37.50%，对万古霉素、呋喃妥因和四环素敏感。结论肿瘤患者非血液无菌体液中MDRO分布广泛，且不同病原菌具有不同耐药特征，临床上需要合理选用抗菌药物，以降低肿瘤患者感染的发生风险。