目的探讨微小RNA-28-3p（miR-28-3p）、白细胞介素-16（IL-16）mRNA在初诊多发性骨髓瘤（MM）患者中的表达特征及其临床价值。方法选取2022年1-12月在聊城市人民医院就诊并初诊为MM的54例患者作为MM组，并选取同期21例缺铁性贫血（IDA）患者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测两组患者骨髓miR-28-3p及IL-16 mRNA表达水平。通过受试者工作特征（ROC）曲线及曲线下面积（AUC）评估miR-28-3p、IL-16 mRNA对MM的诊断价值，采用Pearson相关法分析二者的相关性。比较不同临床特征MM患者miR-28-3p及IL-16 mRNA表达水平的差异，并通过Kaplan-Meier生存曲线分析不同miR-28-3p及IL-16 mRNA表达水平患者的预后。结果MM组骨髓miR-28-3p表达水平低于对照组，IL-16 mRNA表达水平高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。ROC曲线分析结果显示，miR-28-3p及IL-16 mRNA联合检测诊断效能（AUC为0.973）显著优于miR-28-3p、IL-16 mRNA单独检测（AUC为0.901、0.969）。MM患者miR-28-3p与IL-16 mRNA表达水平呈负相关（r=-0.599，95%CI:-0.745~-0.395，P<0.001）。分期晚、β2-微球蛋白水平高、细胞遗传学高危的初诊MM患者miR-28-3p呈低表达、IL-16 mRNA呈高表达（P<0.05）。miR-28-3p高表达（HR=2.42，95%CI：1.13~5.17，P=0.023）、IL-16 mRNA低表达（HR=0.38，95%CI：0.18~0.91，P=0.012）患者生存率更高。结论miR-28-3p、IL-16 mRNA表达水平与初诊MM患者分期及高危细胞遗传学异常有关，均可影响患者预后，有望作为初诊MM患者辅助诊断及判断预后的生物标志物。