目的建立基于重组酶介导等温核酸扩增（RAA）、CRISPR/Cas12a及侧向流层析试纸条（LFIA）技术的肺炎支原体（MP）双模式快速检测平台。方法靶向MP P1基因保守区设计RAA引物及crRNA。系统优化RAA反应时间、CRISPR/Cas12a体系核心组分浓度及CRISPR反应时间等关键参数，通过实时荧光监测/LFIA裸眼可视化判读双模式，评估该平台的分析性能：灵敏度（梯度稀释MP质粒模板，10 -1~10 5 copy/μL）、特异度（7种呼吸道病原体包括人型支原体、肺炎衣原体等）及临床一致性［以实时荧光定量PCR（qPCR）为金标准验证25例咽拭子样本］。结果建立的RAA-CRISPR双模式平台最佳反应条件为RAA反应时间15 min、Cas12a 80 nmol/L、crRNA 90 nmol/L、CRISPR反应时间40 min。荧光模式检测限（LOD）为1 copy/μL，检出率达98.3%（59/60,95%CI:94.7%~99.8%）；LFIA模式LOD为1 copy/μL，检出率达96.7%（58/60,95%CI:88.4%~99.5%）；与所有测试病原体无交叉反应。临床验证结果显示，该平台检测结果与qPCR完全一致，灵敏度、特异度及总符合率均为100.0%，检测时间较短，全程≤55 min。结论建立的RAA-CRISPR双模式平台兼具超敏性、可视化及操作便捷性，可为MP感染的基层即时检验（POCT）提供高效解决方案。