河北省中医药科研计划项目(2018459)
目的探讨锌指蛋白和SCAN域结构蛋白12(ZSCAN12)通过调控谷氨酰胺代谢对人前列腺癌DC145细胞增殖及顺铂化疗敏感性的影响。方法收集该院28例前列腺癌患者癌灶组织和癌旁正常组织标本。将前列腺癌细胞DU145分为si-NC组、si-ZSCAN12、V-9302组和si-ZSCAN12+V-9302组,分别转染si-NC序列、si-ZSCAN12序列和(或)谷氨酰胺抑制剂V-9302,并设置空白对照(control组)。使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和蛋白质印迹(Western blot)法检测组织和细胞ZSCAN12 mRNA和蛋白表达水平。采用CCK-8及流式细胞术检测细胞增殖活力和细胞凋亡率,酶联免疫吸附试验试剂盒检测细胞中谷氨酰胺、谷氨酸及α-酮戊二酸水平。采用不同质量浓度顺铂处理DU145细胞,CCK-8检测计算细胞顺铂耐药半抑制浓度(IC50),Western blot法检测谷氨酰胺代谢相关蛋白(GLUD1)及耐药相关蛋白[多药耐药相关蛋白1(MRP1)、P糖蛋白(P-gp)]水平。结果前列腺癌组织和细胞中ZSCAN12 mRNA及蛋白表达量显著高于癌旁正常组织和前列腺上皮细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。与control组比较,si-ZSCAN12组DC145细胞增殖活力、谷氨酰胺摄取量、谷氨酸产量、α-酮戊二酸水平及GLS、GLUD1蛋白表达明显降低,细胞凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与control组相比,si-ZSCAN12组细胞IC50明显降低,MRP1和p-gp蛋白表达水平明显抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。结论前列腺癌中ZSCAN12显著高表达,敲低ZSCAN12可抑制肿瘤细胞的增殖和谷氨酰胺代谢,促进细胞凋亡,降低肿瘤细胞顺铂耐药性,其可能通过调控谷氨酰胺代谢途径参与了前列腺癌的发生发展。
武俊平,马琳,任慧芳,马文波. ZSCAN12通过谷氨酰胺代谢影响人前列腺癌DC145细胞增殖及顺铂化疗敏感性[J].《国际检验医学杂志》编辑部,2025,(22):2785-2790