目的探讨血清微小RNA-128-3p（miR-128-3p）、D-二聚体/纤维蛋白原（D/F）与全膝关节置换术（TKR）后下肢深静脉血栓（DVT）形成的关系。方法选取该院2023年7月至2024年10月收治的118例行TKR的患者作为观察组，另选择该院体检健康的志愿者122例作为对照组，采用实时荧光定量PCR检测受试者血清miR-128-3p相对表达水平，采用全自动凝血分析仪以免疫比浊法和凝固法分别检测D-二聚体和纤维蛋白原水平，计算D/F；行TKR的患者根据下肢DVT发生情况分为DVT组（n=39）和非DVT组（n=79）；采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-128-3p、D/F预测TKR患者术后下肢DVT形成的价值；多因素Logistic回归分析影响TKR患者术后下肢DVT形成的因素。结果观察组较对照组血清miR-128-3p、D/F均升高（P＜0.05）；与非DVT组比较，DVT组血清miR-128-3p、D/F均升高（P＜0.05）；血清miR-128-3p、D/F升高是行TKR患者术后下肢DVT形成的危险因素（P＜0.05）；血清miR-128-3p、D/F单独及联合预测下肢DVT形成的曲线下面积分别为0.796、0.882、0.963，联合优于各自单独预测（Z=3.648、2.516，P＜0.05）。结论行TKR患者术后下肢DVT形成者血清miR-128-3p、D/F均升高，二者对下肢DVT形成具有良好的预测价值。