四川省医学(青年创新)科研课题(Q23009)
目的探究环状RNA Sirt1(circ-Sirt1)通过调控微小RNA-124(miR-124)/p53轴对胃癌细胞增殖和转移的影响。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测circ-Sirt1、miR-124表达情况;免疫组织化学染色检测p53表达情况。培养胃癌细胞系AGS、HGC27、N87、SNU1和正常胃上皮细胞GES-1,通过qPCR检测circ-Sirt1、miR-124的表达。对N87细胞进行circ-Sirt1过表达处理,并分为circ-Sirt1过表达组和过表达对照组。通过qPCR检测细胞miR-124表达水平变化,蛋白质印迹法检测p53、Vimentin、N-cadherin、E-cadherin、Bcl-2、Bax和Bad蛋白表达水平变化。免疫荧光实验检测Ki-67表达。EdU、克隆形成、Transwell和划痕实验检测细胞增殖、侵袭和迁移能力。使用双荧光素酶实验分析circ-Sirt1、miR-124和p53之间的靶向关系。结果与癌旁组织相比,胃癌组织中circ-Sirt1和p53表达水平降低(P<0.05),而miR-124表达水平升高(P<0.05)。与正常胃上皮细胞GES-1相比,胃癌细胞中circ-Sirt1和p53表达水平降低(P<0.05),而miR-124表达水平升高(P<0.05)。与过表达对照组相比,circ-Sirt1过表达组细胞增殖、迁移和侵袭活性降低(P<0.05),miR-124、Vimentin、N-cadherin、Bcl-2和Ki-67蛋白表达水平降低(P<0.05),p53、E-cadherin、Bax和Bad蛋白表达水平升高(P<0.05)。双荧光素酶实验表明,circ-Sirt1靶向结合并抑制miR-124表达,而miR-124靶向结合并抑制p53表达。结论circ-Sirt1在胃癌组织中表达下调,并且通过调控miR-124/p53轴抑制胃癌细胞增殖和转移。
冯翎翼,谢茜荣,王雨晶. Circ-Sirt1调控miR-124/p53轴抑制胃癌细胞增殖和转移的机制研究[J].《国际检验医学杂志》编辑部,2026,(02):246-252