目的探讨T细胞受体β链恒定区（TRBC）1、TRBC2双染的流式细胞术检测对T细胞淋巴瘤（TCL）细胞克隆性判断的临床价值。方法回顾性收集昆明医科大学第一附属医院2022年5月至2025年8月应用TRBC1单染（TCL患者28例、非TCL患者48例）及TRBC1、TRBC2双染（TCL患者18例、非TCL患者25例）的骨髓样本资料。根据诊断结果将入选患者分为TCL组（46例）与非TCL组（73例）。采用流式细胞术设门圈定淋巴细胞，结合CD3、CD5等表型标志，分析骨髓αβ-T细胞、CD4 +T细胞、CD8 +T细胞亚群中TRBC的表达特征。结果TRBC1单染患者中，非TCL组患者主要呈多克隆表达，TCL组患者主要呈单克隆表达。TRBC1单染诊断CD4 +CD8 -、CD4 -CD8 +TCL的灵敏度为94%，特异度为96%，阳性预测值为91%。然而，2例非TCL组患者的TRBC1表达率表现为单克隆，难以将反应性增生与肿瘤性单克隆区分，易导致假阳性，对于免疫表型为CD4 -CD8 -的患者TRBC1表达缺失时，不能简单判断为TRBC2表达。TRBC1、TRBC2同步检测中，非TCL均显示多克隆表达，TCL均为单克隆表达，以TRBC2 +及CD4 -CD8 +类TCL高发。非TCL中CD4 +T细胞的TRBC2表达率高于CD8 +T细胞，差异有统计学意义（P＜0.01）。与非TCL组相比，TCL组αβ-T细胞、CD4 +CD8 -TCL患者中的CD4 +T细胞、CD4 -CD8 +TCL患者中的CD8 +T细胞的TRBC2/TRBC1，明显偏离正常范围，差异有统计学意义（P＜0.001）。TRBC1、TRBC2双染诊断CD4 +CD8 -、CD4 -CD8 +TCL灵敏度为100%、特异度达97%、阳性预测值为94%，能更好地区分反应性与克隆性增生。结论流式细胞术TRBC1、TRBC2同步检测是诊断TCL的高效工具，与TRBC1单染相比有更高的准确性和鉴别能力，可精确判断T细胞克隆性及TRBC亚型，对临床诊疗具有重要指导价值。