目的构建基于环介导等温扩增（LAMP）技术的快速检测金黄色葡萄球菌的方法，并评估其对金黄色葡萄球菌的检测能力。方法基于“种内保守”与“种间特异”的双准则，采用本地及在线基于局部比对算法的搜索工具，完成了金黄色葡萄球菌特异性基因筛选。使用Primer Explorer V5软件设计了LAMP引物。建立LAMP基础反应体系，并对扩增温度、Mg 2+和dNTP的浓度及孵育时间进行优化。通过向LAMP反应体系中添加羟基萘酚蓝（HNB）以实现扩增结果的可视化检测。使用优化的LAMP反应体系对16株标准菌株进行交叉反应测试，以验证其特异性。提取10倍梯度稀释的金黄色葡萄球菌悬液（3×10 0~3×10 8 CFU/mL）基因组DNA用于LAMP扩增，以测定其检出限。使用LAMP方法检测了180株临床菌株，评价其诊断效能。结果通过多源生物信息学分析，确定了一段金黄色葡萄球菌种属特异性基因（GenBank:CP049389.1；位置434832-435198 bp），并依据该基因设计了LAMP引物并优化了反应条件。优化后的LAMP体系包含1×等温扩增缓冲液，6.0 U Bst 2.0 DNA聚合酶、6.0 mmol/L Mg 2+、1.2 mmol/L dNTP、120 μmol/L HNB、0.2 μmol/L F3与B3、1.6 μmol/L FIP与BIP、0.8 mol/L甜菜碱，DNA模板和ddH2O，反应程序设置为62 ℃孵育60 min。在优化的反应体系中，LAMP对金黄色葡萄球菌检测的特异度为100.0%，检出限为3×10 1 CFU/反应，准确度为96.7%。结论该研究所建立的LAMP技术简单可靠，可作为金黄色葡萄球菌感染的快速诊断工具。