目的探讨circFAM169A在儿童肝母细胞瘤（HB）中的表达特征、生物学功能及其潜在分子机制。方法采用实时荧光定量PCR（qPCR）检测circFAM169A在HB患儿临床组织及细胞系中的表达水平。通过体外功能实验（流式细胞术、CCK-8实验、克隆形成实验）及体内裸鼠成瘤实验，评估circFAM169A对细胞凋亡、增殖及肿瘤生长的影响。利用免疫印迹法和qPCR分析circFAM169A对DNA损伤应答通路关键分子表达的影响。通过双荧光素酶报告基因实验、qPCR及免疫印迹法验证，探究其作为微小RNA（miRNA）海绵的竞争性内源RNA的机制。结果circFAM169A在HB患儿组织及细胞系中特异性高表达，且独立于其亲本基因FAM169A。敲低circFAM169A可显著抑制细胞增殖与克隆形成，并诱导细胞凋亡，在体内同样有效抑制肿瘤生长。机制上，干扰circFAM169A可激活DNA损伤应答通路。circFAM169A可直接吸附miR-1253，从而解除miR-1253对其下游靶基因CDK6的抑制作用，形成circFAM169A/miR-1253/CDK6功能轴。结论circFAM169A在HB中作为致癌分子，通过抑制DNA损伤应答、circFAM169A/miR-1253/CDK6轴驱动肿瘤进展，是有潜力的诊断标志物，该研究结果可为HB患儿的靶向治疗提供理论依据。