武汉市医学科研项目(WX19Q30)
目的探索微小RNA-155-5p(miR-155-5p)通过调控组蛋白赖氨酸脱甲基酶4C(KDM4C)对胃癌(GC)细胞增殖和凋亡的影响。方法采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和免疫印迹(Western blotting)测定体外培养的人GC细胞株(AGS、BGC-823、HGC-27)及胃黏膜上皮细胞(GES-1)中miR-155-5p、KDM4C mRNA及蛋白的水平,双荧光素酶报告分析miR-155-5p和KDM4C的关系。将AGS细胞随机分为Control组、miR-NC组、miR-155-5p mimics组、miR-155-5p mimics+pcDNA-NC组、miR-155-5p mimics+pcDNA-KDM4C组。采用RT-qPCR测定各组miR-155-5p、KDM4C mRNA表达,WST-1试验测定各组细胞的增殖,划痕试验测定各组细胞的迁移,Transwell试验测定各组细胞的侵袭,流式细胞术测定各组细胞的凋亡,Western blotting测定各组细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、KDM4C蛋白水平。结果人GC细胞株中miR-155-5p低表达(P<0.05),KDM4C mRNA及蛋白高表达(P<0.05)。双荧光素酶报告显示,WT-KDM4C+miR-155-5p mimics组和WT-KDM4C+mimics-NC组比较,荧光素酶活性减弱(P<0.05)。miR-155-5p mimics组和miR-NC组、Control组比较,AGS细胞的存活率、PCNA、划痕愈合率、侵袭数、KDM4C mRNA和蛋白表达水平降低,而miR-155-5p、凋亡率、cleaved caspase-3表达水平升高(P<0.05);miR-155-5p mimics+pcDNA-KDM4C组和miR-155-5p mimics+pcDNA-NC组、miR-155-5p mimics组比较,AGS细胞的存活率、PCNA、划痕愈合率、侵袭数、KDM4C mRNA和蛋白表达水平升高,而miR-155-5p、凋亡率、cleaved caspase-3表达水平降低(P<0.05);miR-155-5p mimics+pcDNA-NC组、miR-155-5p mimics+pcDNA-KDM4C组与miR-NC组和Control组相比,AGS细胞的存活率、PCNA、划痕愈合率、侵袭数、KDM4C mRNA和蛋白水平降低,而miR-155-5p、凋亡率、cleaved caspase-3水平升高(P<0.05)。结论过表达miR-155-5p可靶向下调KDM4C表达,进而抑制GC细胞的增殖及转移,促进细胞凋亡。
黄丹 ,许汉兵 △. miR-155-5p通过调控KDM4C对胃癌细胞增殖和凋亡的影响[J].《国际检验医学杂志》编辑部,2026,(10):1153-1159