生物正交点击化学是一类能够在复杂生物体系中快速、选择性发生而不受内源性生化过程干扰的反应，因其高效、温和与特异性，引起生命科学与医学研究领域的关注。近年来，该技术逐渐渗透到体外诊断领域，成为构建新型检测方法与多重诊断平台的重要工具。该文综述了生物正交点击化学的发展历程、基本类型，并阐述其反应机制，重点探讨其在信号标记与放大、多重检测与分析、循环肿瘤细胞与细胞外囊泡捕获与检测等体外诊断平台中的应用进展，特别关注其与微流控、纳米材料及数字化技术的融合。最后分析了其在成本、标准化与临床转化方面的挑战与前景。