目的探究DNA甲基化对三螺旋核酸结构稳定性的影响，并构建基于三螺旋核酸构象稳定性与抗体-信号放大单元协同调控的动态传感方法以实现DNA甲基化单碱基分辨率检测。方法通过分子建模构建了一种三螺旋核酸探针，并通过分子动力学模拟分析甲基化位点对该探针结构稳定性的影响。然后，基于该三螺旋核酸探针构象转换建立了一种电化学传感新方法，并对该体系进行了一系列表征及性能验证。结果当三螺旋附近存在1~2个甲基化位点时，三螺旋整体结构保持相对稳定。而当甲基化位点数目增加到5个时，三螺旋结构的稳定性开始下降。基于三螺旋核酸构象转换构建的特异性电化学传感新方法，实现了DNA甲基化位点的单碱基分辨率检测，其最大分辨能力为7个甲基化位点。结论该研究揭示了DNA甲基化修饰对三螺旋核酸结构稳定性的调控机制，并建立了一种DNA甲基化单碱基分辨检测策略。