目的探究高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染患者宫颈组织TAFA趋化因子样家族成员4（FAM19A4）、POU结构域第4类转录因子3（POU4F3）基因启动子甲基化水平与宫颈病变严重程度的关系，分析二者对宫颈上皮内瘤变（CIN）2+病变（通常指CIN2及以上级别病变）的诊断价值。方法收集2022年4月至2024年4月于该院妇科就诊且HR-HPV阳性的122例患者宫颈组织标本，根据病理检查结果分为宫颈癌组（22例）、正常/炎症组（26例）、低级别鳞状上皮内病变（LSIL）组（36例）和高级别鳞状上皮内病变（HSIL）组（38例）。采用甲基化特异性PCR检测各组FAM19A4、POU4F3基因启动子甲基化水平，分析二者甲基化水平与HR-HPV DNA负荷量的相关性。采用实时定量PCR检测各组FAM19A4、POU4F3 mRNA表达水平。将HSIL、宫颈癌患者归为CIN2+，绘制受试者工作特征曲线分析FAM19A4、POU4F3甲基化单独及联合检测对CIN2+病变的诊断价值。结果正常/炎症组、LSIL组、HSIL组、宫颈癌组的FAM19A4、POU4F3基因甲基化水平依次升高(P＜0.05)；正常/炎症组、LSIL组、HSIL组、宫颈癌组的FAM19A4、POU4F3 mRNA表达水平依次降低(P＜0.05)。正常/炎症组、LSIL组、HSIL组、宫颈癌组宫颈组织中HR-HPV DNA负荷量及TCT异常率依次升高 (均P<0.05)。FAM19A4、POU4F3甲基化水平与HR-HPV DNA负荷量呈正相关(r=0.712、0.678，均P<0.05)。FAM19A4、POU4F3甲基化联合诊断CIN2+病变的曲线下面积为0.886（95%CI：0.862～0.947），显著大于FAM19A4、POU4F3单项检测0.747（95%CI：0.702～0.787）、0.792（95%CI：0.761～0.833）,差异有统计学意义（Z=4.624、4.112，均P<0.05）。结论FAM19A4和POU4F3基因启动子的甲基化与宫颈病变的严重程度相关，二者联合检测对CIN2+具有较高的诊断价值。