目的探讨试剂盒提取法和短时培养法在血流感染病原菌快速鉴定中的应用，建立科学、高效且可行的菌体富集方法。方法收集2024年9月至2025年9月乐山市中医医院微生物实验室血培养阳性样本，经直接涂片革兰染色确定为单一病原菌后，分别采用试剂盒提取法和2、3、4、5、6 h短时培养法富集菌体并进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）鉴定，以单个菌落法质谱鉴定结果为参考标准，比较不同富集方法的鉴定符合率和平均检测时间。 结果191份血培养阳性样本中分离出革兰阴性菌135株，革兰阳性菌54株，真菌2株。试剂盒提取法鉴定符合率为90.58%，短时培养法在2、3、4、5、6 h的鉴定符合率依次为69.11%、83.25%、93.72%、94.76%、94.76%，两种富集法对革兰阴性菌的鉴定符合率均显著高于革兰阳性菌（P<0.001）。4、5、6 h短时培养法鉴定符合率与2、3 h短时培养法相比，差异有统计学意义（P<0.01）；与试剂盒提取法相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。2种富集法比单个菌落法可缩短周转时间7~18 h。 结论基于MALDI-TOF MS的试剂盒提取法与4 h短时培养法均是实现血流感染病原菌快速鉴定的有效菌体富集手段，且能显著缩短血培养阳性样本周转时间。血培养报阳后可优先采用试剂盒提取法，若鉴定失败则采用4 h短时培养法。